고정된 조직 샘플에 X-CLARITY™ 하이드로젤 용액 (X-CLARITY™ Hydrogel Solution)을 가하면 하이드로젤 단량체 (Hydrogel Monomer)가 샘플 전체에 고르게 스며들게 됩니다. X-CLARITY™ 중합 시스템 (X-CLARITY™ Polymerization System)에 옮겨진 후 하이드로젤 단량체가 중합체 (Polymer)로 바뀌면서 견고한 망 구조가 형성되는데, 단백질이나 핵산과 같은 생체고분자가 이에 결합하여 생체 내에서의 고유 구조를 유지할 수 있습니다. 하이드로젤 망에 결합된 조직은 X-CLARITY™ 조직 투명화 시스템 II (X-CLARITY™ Tissue Clearing System II)에서 X-CLARITY™ 조직 투명화 용액 (Electrophoretic Tissue Clearing Solution)을 사용하여 전기영동 방식으로 투명화됩니다. 전기영동 과정을 통해 세포 내 지질이 제거되면 결과적으로 화학적 및 광학적으로 개방된 투명한 조직-하이드로젤 결합체 (Tissue-Hydrogel Hybrid)가 만들어지는데, 이 최종 구조를 통해 생체고분자들의 세포 내 프로파일을 정량적 정성적으로 확인할 수 있게 됩니다.
투명화 조직 내에 존재하는 타겟 분자들을 광학적으로 관찰하기 위해 DeepLabel™ 항체 염색 키트 (DeepLabel™ Antibody Staining Kit)를 사용하는데, 투명화 조직에 대한 항체 침투 효율을 획기적으로 향상시켜 조직 심부에서의 항체 표지도 가능하게 합니다. 본 키트는 또한 CLARITY, iDISCO, 3DISCO, uDISCO, Visikol, CUBIC과 같은 다양한 투명화 방법과도 조합하여 사용할 수 있어 활용도가 매우 뛰어납니다.
하이드로젤 망에 결합된 투명화 조직은 영상 촬영을 위해 굴절률 동질화 용액 (RI Matching Solution)에 보관합니다. 이는 투명화 조직 내의 환경을 보관용액과 유사한 수준으로 동질화하여 광산란을 줄이고 광 투명도를 높이는 과정으로서, 결과적으로 품질이 좋고 심도가 높은 영상을 얻을 수 있게 됩니다.
“[The X-CLARITY] has actually been fundamental to the Data Brain Project because without being able to clear tissues of the lipids, we wouldn’t be able to image deep into brains. So we wouldn’t be able to extract that structural information that is so important to understand the function of mammalian brains. It’s been a huge advantage and a great leap forward in imaging.”
“Thanks to X-CLARITY, we now have access to the threedimensions of the whole heart organ.”
