固定済みの組織サンプルをX-CLARITY™ ハイドロゲル溶液キットに浸漬し、ハイドロゲルモノマーを均一に拡散させた後、X-CLARITY™ 重合システムで重合します。嫌気的環境下でモノマーが重合し、生体分子を頑丈なハイドロゲルネットワークに固定、分子情報と構造を保持します。 得られた組織-ハイドロゲルハイブリッドは、X-CLARITY™ Tissue Clearing System IIを使用して、電気泳動法またはパッシブ法で脂質を除去し、透明で化学的にアクセス可能な状態にします。
透明化された組織サンプルは、DeepLabel™ 抗体染色キットを用いて抗体で標識します。このキットは抗体の組織内部への浸透を促進し、CLARITY(能動・受動両方)、iDISCO、3DISCO、uDISCO、Visikol、CUBICなど、さまざまな透明化手法に対応しています。
撮像前に、組織-ハイドロゲルハイブリッドをRIマッチング溶液に浸すことで、組織内部と外部の光学環境を均一化し、光散乱を抑えます。これにより、透明性と画像品質、さらには撮像深度が大幅に向上します。
“[The X-CLARITY] has actually been fundamental to the Data Brain Project because without being able to clear tissues of the lipids, we wouldn’t be able to image deep into brains. So we wouldn’t be able to extract that structural information that is so important to understand the function of mammalian brains. It’s been a huge advantage and a great leap forward in imaging.”
“Thanks to X-CLARITY, we now have access to the threedimensions of the whole heart organ.”